人羧化基質(zhì)Gla蛋白(cMGP)ELISA檢測試劑盒組成： 微孔酶標(biāo)板（ 12 孔×8 條）；標(biāo)準(zhǔn)品 （0.3mL*6 管 ）；本稀釋液（ 6mL）；檢測抗體-HRP （10mL） ；20×洗滌緩沖液 （25mL， 按說明書進(jìn)行稀釋）；底物 A（ 6mL）；底物 B （6mL）；終止液 （6mL） ；封板膜； 說明書 ；自封袋 。

操作程序總結(jié)：

1） 準(zhǔn)備試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。

2） 加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)30分鐘。

3） 洗板5次，加入酶標(biāo)試劑，37℃反應(yīng)30分鐘。

4） 洗板5次，加入顯色液A、B，37℃顯色10分鐘。

5） 加入終止液，15分鐘內(nèi)讀OD值

6） 計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的 OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計算出標(biāo) 準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)， 即為樣品的實際濃度。

注意事項：

1.  實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。

2.  加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免第一孔與最后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。

3.  孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。 

4.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。

5.  建議實驗前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 

6.  建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個標(biāo)本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商聯(lián)系，如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

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